5-FOA 5-氟乳清酸 酵母反篩選劑 表達(dá)分析

5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸（酵母反篩選藥物）

【溫馨提示】：見我司懋康生物整理的酵母雙雜交檢測(cè)（Yeast two-hybrid assay）產(chǎn)品專題。

基本描述

5-氟乳清酸（5-Fluoroorotic Acid，5-FOA）用于酵母反選是一種常用的分子遺傳篩選方法。酵母菌質(zhì)粒清除、質(zhì)粒穿梭、等位置換和雙雜交篩選都會(huì)用到5-FOA。5-FOA自身對(duì)酵母細(xì)胞無(wú)毒，但功能型URA3基因能編碼表達(dá)乳清酸核苷-5′-單磷酸脫羧酶（OMP脫羧酶），將其轉(zhuǎn)化為有毒形式（如5-氟*），從而使得酵母細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)。篩選之后，表型Ura⁺的酵母菌變?yōu)?/span>Ura^-和5-FOA（R）的酵母菌。

產(chǎn)品應(yīng)用：

1. 檢測(cè)酵母URA3基因表達(dá)；

2. 構(gòu)建酵母雙雜交文庫(kù)；

3. 其他酵母遺傳學(xué)領(lǐng)域包括基因替換，可移動(dòng)遺傳因子分析和基因突變鑒定研究。

篩選對(duì)象：

Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe, and other fungi species containing URA3 orthologs.

產(chǎn)品特性：

1. 供貨形式：化學(xué)合成的5-FOA一水合物粉末或液體

2. 保存方法：-20oC

3. 分子式：C₅H₃FN₂O₄• H₂O

4. 分子量：174.0

5. 純度：≥ 98%

產(chǎn)品應(yīng)用：

圖 1. 使用 5-FOA 反選酵母。測(cè)試了niao嘧啶 (ura3-1) 營(yíng)養(yǎng)缺陷型酵母菌株在含有 5-FOA 的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的能力。測(cè)試了三種菌株：?jiǎn)为?dú)的野生型（YZ1）、帶有URA3標(biāo)記的低拷貝質(zhì)粒的野生型（YZ2）以及刪除必需基因（△EG）且不能失去互補(bǔ)的URA3質(zhì)粒的突變菌株（YZ3）。

Fig 1. Counter selection of yeast using 5-FOA. Yeast strains that are auxotrophic for uracil (ura3-1) were tested for their ability to grow on 5-FOA containing media. Three strains were tested: wt alone (YZ1), wt with a URA3 marked low copy plasmid (YZ2), and a mutant strain with a deletion of an essential gene (△EG) that could not lose a complementing URA3 plasmid (YZ3).

.從左到右、從上到下分別是合成wan全葡萄糖培養(yǎng)基（SC）： 1. SC，合成wan全無(wú)5FOA；2. 標(biāo)準(zhǔn)品 - SC-5-FOA（由超純 5-FOA 粉末制成的 SC-5-FOA，1 克/升） 3. 由 100X 5-FOA 溶液制成的 SC-5-FOA；4：SC-5-FOA 由 2X SC/5-FOA 制成。

.From left to right, top to bottom are synthetic complete glucose medium (SC): 1. SC, synthetic complete no 5FOA; 2. Standard - SC-5-FOA (SC-5-FOA made from ultra-pure 5-FOA powder, 1 g/liter) 3. SC-5-FOA made from 100X 5-FOA solution; 4: SC-5-FOA made from 2X SC/5-FOA.

對(duì)于每個(gè)板，上：酵母菌株：YZ1 野生型，Ura-（wt，ura-3-52），右：酵母菌株：YZ2，攜帶低拷貝的 wt，單獨(dú)的 URA3 質(zhì)粒，左：酵母菌株：YZ3 ：△EG，含有互補(bǔ)質(zhì)粒（pRS316：EG、URA3、CEN）。對(duì)于所有含有 5-FOA 且沒有明顯 5-FOAR 菌落的培養(yǎng)基，針對(duì)菌株 YZ3 的反選擇是明顯的（參見左圖，YZ3：在板 2、3 和 4 中）。來(lái)自對(duì)照菌株 YZ1 和 YZ2 的細(xì)胞能夠在 5-FOA 培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。

For each plate, Top: Yeast strain: YZ1 wild-type, Ura- (wt, ura-3-52), Right: Yeast strain: YZ2, wt carrying a low copy, URA3 plasmid alone, and Left: Yeast strain: YZ3: △EG, containing the complementing plasmid (pRS316: EG, URA3, CEN). The counter selection against strain YZ3 was evident for all media containing 5-FOA with no 5-FOAR colonies evident (see left panels, YZ3: in plates 2, 3, and 4). Cells from control strains YZ1 and YZ2 were able to grow on 5-FOA media.

產(chǎn)品訂購(gòu)：Zymo Research*，現(xiàn)貨供應(yīng)，咨詢，：。

由于5-FOA水溶性較差，操作起來(lái)比較麻煩，還另提供DMSO儲(chǔ)存液（100 x）。

F9001 5-Fluoroorotic Acid Datasheet

另提供進(jìn)口分裝的5-FOA，性價(jià)比更高，現(xiàn)貨供應(yīng)，，：。

注意事項(xiàng)：

1）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

2）本品僅用作科研用途，不能用作診斷和藥物。

— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作，主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠(chéng)為信、合同守信"的經(jīng)營(yíng)理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。

5-FOA 5-氟乳清酸 酵母反篩選劑 表達(dá)分析

5-FOA 5-氟乳清酸 酵母反篩選劑 表達(dá)分析